သုတေသနတွင် အပူစက်ဘီးစီးသူများ၏ စွယ်စုံရနိုင်စွမ်းကို စူးစမ်းပါ။

PCR စက်များဟုလည်းသိကြသော အပူစက်ဘီးသမားများသည် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒနှင့် မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာသုတေသနတွင် အရေးကြီးသောကိရိယာများဖြစ်သည်။ ဤတူရိယာများကို polymerase ကွင်းဆက်တုံ့ပြန်မှု (PCR) နည်းပညာဖြင့် DNA နှင့် RNA ချဲ့ထွင်ရန်အသုံးပြုသည်။ သို့ရာတွင်၊ အပူစက်ဘီးစီးသူများ၏ ဘက်စုံသုံးနိုင်မှုသည် PCR အက်ပ်လီကေးရှင်းများတွင် အကန့်အသတ်မရှိပါ။ ဤဆောင်းပါးတွင်၊ သုတေသနတွင် အပူစက်ဘီးသမားများကို နည်းလမ်းအမျိုးမျိုးဖြင့် အသုံးပြုကြပြီး သိပ္ပံပညာဗဟုသုတများ တိုးတက်စေရေးအတွက် ၎င်းတို့၏အရေးပါပုံကို လေ့လာပါမည်။

1. PCR အသံချဲ့စက်

a ၏အဓိကလုပ်ဆောင်ချက်အပူစက်ဘီးစီးသူမော်လီကျူးဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ အသုံးချပရိုဂရမ်အမျိုးမျိုးအတွက် အရေးကြီးသော PCR amplification လုပ်ဆောင်ရန်ဖြစ်သည်။ DNA သို့မဟုတ် RNA နမူနာကို အပူချိန်ပြောင်းလဲမှုများစွာတွင် ထည့်သွင်းခြင်းဖြင့်၊ အပူစက်ဘီးသမားများသည် nucleic acid strands ၏ denaturation၊ annealing နှင့် extension ကို မြှင့်တင်ပေးကာ တိကျသောပစ်မှတ် sequences များ၏ exponential amplification ကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။ ဤလုပ်ငန်းစဉ်သည် မျိုးရိုးဗီဇခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၊ မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုလေ့လာမှုများနှင့် ကူးစက်နိုင်သော အေးဂျင့်များကို ရှာဖွေတွေ့ရှိမှုအတွက် အရေးကြီးပါသည်။

2. Quantitative PCR (qPCR)

စံ PCR အပြင်၊ အရေအတွက် PCR သို့မဟုတ် qPCR အတွက် အပူစက်ဘီးများကို အသုံးပြုပြီး နမူနာတစ်ခုတွင် nucleic acid ပစ်မှတ်များကို ပမာဏခွဲထုတ်ခွင့်ပြုသည်။ fluorescent ဆိုးဆေး သို့မဟုတ် probes များကို ပေါင်းစပ်ခြင်းဖြင့်၊ အပူစက်ဘီးစီးသူများသည် PCR ထုတ်ကုန်များ၏ စုဆောင်းမှုကို အချိန်နှင့်တပြေးညီ တိုင်းတာနိုင်ပြီး မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုအဆင့်များ၊ ဗိုင်းရပ်စ်ဆိုင်ရာဝန်နှင့် မျိုးရိုးဗီဇကွဲလွဲမှုများအတွက် တန်ဖိုးရှိသော ထိုးထွင်းသိမြင်မှုများကို ပေးဆောင်နိုင်ပါသည်။

3. Reverse transcription PCR (RT-PCR)

Thermal cyclers များသည် နောက်ဆက်တွဲ ချဲ့ထွင်ရန်အတွက် RNA ကို ဖြည့်စွက် DNA (cDNA) အဖြစ်သို့ ပြောင်းပေးသော reverse transcription PCR တွင် အရေးပါသော အခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်ပါသည်။ ဤနည်းလမ်းသည် မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှု၊ RNA ဗိုင်းရပ်စ်များနှင့် mRNA ခွဲထွက်မှုပုံစံများကို လေ့လာရန်အတွက် အရေးကြီးပါသည်။ တိကျသောအပူချိန်ထိန်းချုပ်မှုရှိသောအပူစက်ဘီးသည် RT-PCR စမ်းသပ်မှုများအောင်မြင်ရန်အတွက်အရေးကြီးပါသည်။

4. ဒစ်ဂျစ်တယ် PCR

အပူစက်ဘီးစီးနည်းပညာတွင် တိုးတက်မှုများသည် နျူကလိစ်အက်ဆစ်များ၏ အကြွင်းမဲ့ပမာဏအတွက် အလွန်အထိခိုက်မခံသောနည်းလမ်းဖြစ်သည့် ဒစ်ဂျစ်တယ် PCR ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်လာစေသည်။ PCR တုံ့ပြန်မှုကို ထောင်ပေါင်းများစွာသော microreactions များအဖြစ် ပိုင်းခြားခြင်းဖြင့်၊ အပူစက်ဘီးသမားများသည် ပစ်မှတ်မော်လီကျူး၏ ကနဦးအာရုံစူးစိုက်မှုကို တိကျစွာဆုံးဖြတ်နိုင်ပြီး၊ ဒစ်ဂျစ်တယ် PCR သည် ရှားပါးသော ဗီဇပြောင်းလဲခြင်းကို ထောက်လှမ်းခြင်းနှင့် မိတ္တူကူးယူခြင်းဆိုင်ရာ ကိန်းဂဏာန်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းအတွက် အဖိုးတန်ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်လာသည်။

5. မျိုးဆက်သစ် အတွဲလိုက် စာကြည့်တိုက်များ ပြင်ဆင်ခြင်း။

Thermal cyclers များသည် နောက်မျိုးဆက် sequencing (NGS) အပလီကေးရှင်းများအတွက် စာကြည့်တိုက်ပြင်ဆင်မှုလုပ်ငန်းစဉ်၏ အဓိကအစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ PCR အခြေပြု DNA အပိုင်းအစများကို ချဲ့ထွင်ခြင်းဖြင့်၊ အပူစက်ဘီးသမားများသည် အကန့်အသတ်ရှိသော စတင်ပစ္စည်းမှ စုစည်းထားသော စာကြည့်တိုက်များကို တည်ဆောက်နိုင်စေပြီး သုတေသီများသည် သက်ရှိများ၏ ဂျီနိုမ်၊ စာသားမှတ်တမ်း သို့မဟုတ် epigenome တစ်ခုလုံးကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာနိုင်စေပါသည်။

6. ပရိုတင်း အင်ဂျင်နီယာ နှင့် Mutagenesis

nucleic acid ချဲ့ထွင်ခြင်းအပြင်၊ ပရိုတင်းအင်ဂျင်နီယာနှင့် mutagenesis လေ့လာမှုများတွင် အပူစက်ဘီးများကို အသုံးပြုကြသည်။ site-directed mutagenesis၊ ပရိုတိန်းဖော်ပြခြင်းအား ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းနှင့် ဆင့်ကဲဖြစ်စဉ်များကို ညွှန်ကြားသည့်စမ်းသပ်မှုများသည် PCR-based နည်းပညာများကို မကြာခဏမှီခိုကြပြီး၊ တိကျသောအပူချိန်ထိန်းချုပ်မှုနှင့် တစ်ပြေးညီအပူပေးစနစ်နှင့် အအေးပေးနှုန်းများရှိသည့် အပူစက်ဘီးများသည် တိကျပြီး မျိုးပွားနိုင်သောရလဒ်များရရှိရန် အရေးကြီးပါသည်။

7. ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် အစားအသောက် ဘေးကင်းရေး စမ်းသပ်ခြင်း။

အပူစက်ဘီးများကို ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် အစားအစာ ဘေးကင်းရေး စမ်းသပ်ရာတွင်လည်း အထူးအားဖြင့် အဏုဇီဝပိုးမွှားများကို ထောက်လှမ်းခြင်း၊ မျိုးဗီဇပြုပြင်ထားသော သက်ရှိများ (GMOs) နှင့် အစားအစာမှ ပေါက်ဖွားလာသော ရောဂါပိုးများကို ရှာဖွေခြင်းတွင်လည်း အသုံးပြုပါသည်။ PCR-based စမ်းသပ်မှုများသည် အပူစက်ဘီးစီးသူများပေါ်တွင် လုပ်ဆောင်သည့် ညစ်ညမ်းမှုများကို လျင်မြန်ပြီး တိကျသော ဖော်ထုတ်နိုင်စေကာ အစားအစာနှင့် ပတ်ဝန်းကျင်နမူနာများ၏ အရည်အသွေးနှင့် ဘေးကင်းမှုတို့ကို အာမခံပါသည်။

အကျဉ်းချုပ်မှာ,အပူစက်ဘီးစီးသူများသမားရိုးကျ PCR ချဲ့ထွင်ခြင်းထက် ကျယ်ပြန့်သော အသုံးချပရိုဂရမ်များကို ပံ့ပိုးပေးသည့် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒနှင့် မျိုးရိုးဗီဇသုတေသနတွင် မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော ကိရိယာများဖြစ်သည်။ ၎င်းတို့၏ စွယ်စုံရနှင့် တိကျမှုသည် မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှု ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းမှ ပတ်ဝန်းကျင် စောင့်ကြည့်ခြင်းအထိ စမ်းသပ်မှုများအတွက် အရေးကြီးသည်။ နည်းပညာများ တိုးတက်ပြောင်းလဲလာသည်နှင့်အမျှ အပူစက်ဘီးသမားများသည် သိပ္ပံဆိုင်ရာရှာဖွေတွေ့ရှိမှုနှင့် ဆန်းသစ်တီထွင်မှုများကို မောင်းနှင်ရာတွင် ပို၍အရေးကြီးသောအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်လာဖွယ်ရှိသည်။