PCR Analyyzer Troubleshooting: မကြာခဏမေးလေ့ရှိသောမေးခွန်းများနှင့်ဖြေရှင်းနည်းများ

Polymerase ကွင်းဆက်တုံ့ပြန်မှု (PCR) ဆန်းစစ်သူများသည်မော်လီကျူးဇီဝဗေဒတွင်မရှိမဖြစ်လိုအပ်သောကိရိယာများဖြစ်သည်။ သို့သော်ရှုပ်ထွေးသောကိရိယာများကဲ့သို့ PCR Analyzer သည်စွမ်းဆောင်ရည်ကိုအကျိုးသက်ရောက်စေသောပြ problems နာများကိုကြုံတွေ့ရနိုင်သည်။ ဤဆောင်းပါးသည်အကြောင်းအရာအချို့ကိုဖော်ပြထားသည်PCR Analyzerပြ troubl နာများကိုရှာဖွေခြင်းနှင့်လက်တွေ့ပြ problems နာများကိုလက်တွေ့ကျသောဖြေရှင်းနည်းများကိုထောက်ပံ့ပေးသည်။

1 ။ ကျွန်ုပ်၏ PCR တုံ့ပြန်မှုသည်အဘယ်ကြောင့်မပါသနည်း။

အသုံးပြုသူများကြုံတွေ့ရသောအသုံးအများဆုံးပြ problems နာများထဲမှတစ်ခုမှာ PCR သည်ပစ်မှတ်ကိုပိုမိုကျယ်ပြန့်စေရန် PCR တုံ့ပြန်မှု၏မတတ်နိုင်ခြင်းဖြစ်သည်။ ၎င်းကိုအချက်များစွာနှင့်ဆက်စပ်မှုရှိနိုင်သည်။

မမှန်ကန်သော Primer Design - သင်၏ Primer သည် Target Sequence ကိုသတ်ရန်သေချာအောင်လုပ်ပါ။ အကောင်းဆုံးအရည်ပျော်သောအပူချိန် (TM) ရှိသည်။ nonscific စည်းနှောင်ခြင်းကိုရှောင်ရှားရန် Primer ဒီဇိုင်းအတွက် software tools များကိုသုံးပါ။

Template မလုံလောက်မှုမလုံလောက်ပါ။ သင်သည်လုံလောက်သော template dna လုံလောက်စွာအသုံးပြုနေသည်ကိုစစ်ဆေးပါ။ အနည်းငယ်သာလျော့နည်းလာခြင်းသို့မဟုတ်မ erplification ကိုဖြစ်ပေါ်လိမ့်မည်။

နမူနာတွင် inhibitors - နမူနာရှိညစ်ညမ်းမှုသည် PCR ၏တုံ့ပြန်မှုကိုတားဆီးနိုင်သည်။ သင်၏ DNA ကိုသန့်ရှင်းစင်ကြယ်စေခြင်းသို့မဟုတ်ကွဲပြားသောထုတ်ယူနည်းလမ်းကိုသုံးရန်စဉ်းစားပါ။

ဖြေရှင်းချက် - သင်၏ primer ဒီဇိုင်းကိုစစ်ဆေးပါ, template အာရုံစူးစိုက်မှုကိုတိုးမြှင့်ခြင်းနှင့်သင်၏နမူနာ inhibitors inhibitors မပိန်မွောငျးမဆံ့သေချာပါစေ။

2 ။ ကျွန်ုပ်၏ PCR ထုတ်ကုန်သည်အဘယ်ကြောင့်မှားယွင်းနေသနည်း။

အကယ်. သင်၏ PCR ထုတ်ကုန်အရွယ်အစားသည်မျှော်လင့်ထားသည့်အတိုင်းမဟုတ်ပါက၎င်းသည်တုန့်ပြန်မှုအခြေအနေများသို့မဟုတ်ပါဝင်ပစ္စည်းများပါ 0 င်သည့်ပြ a နာကိုပြသနိုင်သည်။

တိကျသော amplification: Primer သည်မရည်ရွယ်ဘဲတည်နေရာကိုချည်နှောင်ထားလျှင်၎င်းသည်ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်။ ပေါက်ကွဲမှုကဲ့သို့သောကိရိယာတစ်ခု သုံး. primer များ၏တိကျသောစစ်ဆေးမှုကိုစစ်ဆေးပါ။

မမှန်ကန်ကြောင်း Annealing အပူချိန် - Annealing အပူချိန်အလွန်နိမ့်လွန်းလျှင်, Gradient PCR မှ Annealing အပူချိန်ကိုအကောင်းမြင်ခြင်း။

ဖြေရှင်းချက် - Primer ၏အသေးစိတ်အချက်အလက်ကိုအတည်ပြုပြီး PCR ထုတ်ကုန်များ၏တိကျမှန်ကန်မှုကိုတိုးတက်စေရန် Annealing အပူချိန်ကိုအကောင်းဆုံးဖြစ်စေပါ။

3 ။ ကျွန်ုပ်၏ PCR Analyzer သည်အမှားအယွင်းတစ်ခုရှိသည်။ ကျွန်တော်ဘာလုပ်သင့်သလဲ?

PCR Analyzer ရှိအမှားအယွင်းများသည်ကြောက်မက်ဖွယ်ကောင်းသော်လည်းအလားအလာရှိသောပြ problems နာများကိုသဲလွန်စများပေးနိုင်သည်။

စံကိုက်ညှိပြ issues နာများ - PCR Analyzer ကိုမှန်ကန်စွာချိန်ညှိရန်သေချာအောင်လုပ်ပါ။ ပုံမှန်ပြုပြင်ထိန်းသိမ်းမှုနှင့်စံကိုက်ညှိစစ်ဆေးမှုများသည်တိကျသောရလဒ်များကိုရယူရန်အတွက်အရေးကြီးသည်။

ဆော့ (ဖ်) ဝဲအဖွဲ့ - တခါတရံတွင် software bug များသည်ပြ problems နာများဖြစ်စေနိုင်သည်။ သင့်ကွန်ပျူတာကို Restart လုပ်ပြီး software update များကိုစစ်ဆေးပါ။

ဖြေရှင်းချက် - တိကျသောအမှားကုဒ်အတွက်သုံးစွဲသူလက်စွဲကိုရည်ညွှန်းပြီးအကြံပြုထားသောပြ troubl နာဖြေရှင်းခြင်းအဆင့်များကိုလိုက်နာပါ။ ပုံမှန်ပြုပြင်ထိန်းသိမ်းမှုသည်ပြ problems နာများစွာကိုတားဆီးနိုင်သည်။

4 ။ ကျွန်ုပ်၏ PCR တုံ့ပြန်မှုသည်အဘယ်ကြောင့်ရလဒ်များရရှိမည်နည်း။

ကိုက်ညီမှုမရှိသော PCR ရလဒ်များသည်အကြောင်းပြချက်များစွာအတွက်စိတ်ပျက်စရာကောင်းနိုင်သည်။

ဓါတ်ကူပစ္စည်းအရည်အသွေး - အင်ဇိုင်းများ, ကြားခံများနှင့် DNTPS အပါအ 0 င်ဓါတ်ကူပစ္စည်းအားလုံးကိုလတ်ဆတ်သော, သက်တမ်းကုန်ဆုံးသို့မဟုတ်ညစ်ညမ်းဓါတ်ပေးသည်အမျိုးမျိုးပြောင်းလဲစေနိုင်သည်။

အပူစက်ဘီးစီးချိန်ညှိမှု - ကိုက်ညီမှုမရှိသောအပူချိန်ချိန်ညှိချက်များသည် PCR ဖြစ်စဉ်ကိုအကျိုးသက်ရောက်နိုင်သည်။ ပုံမှန်အပူစက်ဘီးစီးချိန်ညှိမှုကိုပုံမှန်စစ်ဆေးပါ။

ဖြေရှင်းချက် - အရည်အသွေးမြင့်မားသောဓါတ်ကူပစ္စည်းများကို အသုံးပြု. အရည်အသွေးမြင့်မားသောရလဒ်များကိုသင်ပုံမှန်ရရှိသောရလဒ်များကိုသေချာအောင်လုပ်ပါ။

5 ။ PCR တုံ့ပြန်မှုကိုတိုးတက်အောင်လုပ်နည်း။

PCR တုံ့ပြန်မှုများ၏ထိရောက်မှုကိုတိုးတက်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းသည်အထွက်နှုန်းပိုမိုမြင့်မားခြင်းနှင့် ပို. ယုံကြည်စိတ်ချရသောရလဒ်များကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်။

တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများအရအကောင်းမြင်ပါ။ စမ်းသပ်မှုအမျိုးမျိုးကိုစမ်းသပ်ခြင်း, PCR ၏တုံ့ပြန်မှုတစ်ခုစီသည်စွမ်းဆောင်ရည်အတွက်ထူးခြားသောအခြေအနေများလိုအပ်နိုင်သည်။

မြင့်မားသော Fidelity အင်ဇိုင်းများကိုသုံးပါ။

ဖြေရှင်းချက် - သင်၏တိကျသော PCR setup အတွက်အကောင်းဆုံးအခြေအနေများကိုရှာဖွေရန်အကောင်းဆုံးစမ်းသပ်မှုပြုလုပ်ပါ။

အကျဉ်းချုပ်မှာ

တစ် ဦး ပြ troubl နာဖြေရှင်းခြင်းPCR Analyzerစိတ်ညစ်စရာကောင်းသောအလုပ်တစ်ခုဖြစ်နိုင်သည်, သို့သော်ဘုံပြ problems နာများကိုနားလည်ခြင်းနှင့်သူတို့၏ဖြေရှင်းနည်းများသည်သင်၏ PCR အတွေ့အကြုံကိုသိသိသာသာတိုးတက်စေနိုင်သည်။ ဤဘုံပြ problems နာများကိုဖြေရှင်းခြင်းအားဖြင့်သုတေသီများသည်PCRရယူခြင်းကိုတိုးတက်စေပြီးမော်လီကျူးဇီဝဗေဒ applications များတွင်ယုံကြည်စိတ်ချရသောရလဒ်များကိုရရှိနိုင်ပါသည်။ ပုံမှန်ပြုပြင်ထိန်းသိမ်းမှု, ပြန်လည်ပြုပြင်ခြင်းကိုဂရုတစိုက်ရွေးချယ်ခြင်းနှင့်တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများပိုမိုကောင်းမွန်စေရန်အတွက်အောင်မြင်သော PCR ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းအတွက်သော့ချက်များဖြစ်သည်။