နွေရာသီသိပ္ပံလမ်းညွှန်- 40°C အပူလှိုင်းတစ်ခုသည် မော်လီကျူးစမ်းသပ်မှုများနှင့် ကိုက်ညီသောအခါ

မကြာသေးမီက တရုတ်နိုင်ငံ၏ နေရာအနှံ့အပြားတွင် အပူချိန်မြင့်မားနေခဲ့သည်။ ရှန်တုံပြည်နယ် မိုးလေဝသစောင့်ကြည့်လေ့လာရေးဌာနမှ ဇူလိုင်လ ၂၄ ရက်နေ့တွင် အဝါရောင်မြင့်မားသော အပူချိန်သတိပေးချက်ထုတ်ပြန်ခဲ့ပြီး ကုန်းတွင်းပိုင်းဒေသများတွင် လာမည့်လေးရက်အတွင်း စိုစွတ်မှု 80% သည် 35-37°C (111-133°F) ရှိကြောင်း ခန့်မှန်းထားသည်။ Turpan၊ Xinjiang ကဲ့သို့သော နေရာများတွင် အပူချိန်သည် 48°C (111-133°F) နီးကပ်လာသည်။ Hubei၊ Wuhan နှင့် Xiaogan တို့သည် လိမ္မော်ရောင်သတိပေးချက်အောက်တွင်ရှိပြီး အချို့နေရာများတွင် အပူချိန် ၃၇ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်ထက် ကျော်လွန်နေပါသည်။ ပူပြင်းလှသော အပူရှိန်တွင်၊ pipettes ၏မျက်နှာပြင်အောက်ရှိ အဏုကြည့်ကမ္ဘာသည် နျူကလိစ်အက်ဆစ်၏တည်ငြိမ်မှု၊ အင်ဇိုင်းများ၏လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ဓာတ်ပစ္စည်းများ၏ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာအခြေအနေအားလုံးကို အပူလှိုင်းဖြင့် တိတ်တဆိတ်ပုံပျက်နေပါသည်။

Nucleic acid ထုတ်ယူမှုသည် အချိန်နှင့် ဆန့်ကျင်ဘက် ဖြစ်လာသည်။ လေအေးပေးစက်ဖွင့်ထားသော်လည်း ပြင်ပအပူချိန် 40°C ကျော်လွန်သောအခါ၊ လည်ပတ်စားပွဲ၏ အပူချိန်သည် 28°C အထက်တွင် ရှိနေတတ်သည်။ ယခုအချိန်တွင်၊ RNA နမူနာများသည် နွေဦးနှင့် ဆောင်းဦးတွင် နှစ်ဆထက်ပို၍ အဆုတ်အအေးခံမှုတွင် ကျန်ရစ်သည်။ သံလိုက်ပုတီးစေ့ထုတ်ယူမှုတွင်၊ ဆားဗေး၏ အရှိန်အဟုန်ဖြင့် မပြောင်းလဲခြင်းကြောင့် ကြားခံဖြေရှင်းချက်သည် ဒေသအလိုက် ပြည့်နှက်နေပြီး ပုံဆောင်ခဲများသည် အလွယ်တကူ ရွာသွန်းနိုင်သည်။ ဤပုံဆောင်ခဲများသည် nucleic acid ဖမ်းယူနိုင်မှုအပေါ် ကြီးမားသောအတက်အကျဖြစ်စေသည်။ အော်ဂဲနစ်အပျော်အရည်များ ၏ မတည်ငြိမ်မှုသည် တပြိုင်နက် တိုးလာသည်။ 30°C တွင်၊ chloroform volatilization ပမာဏသည် 25°C နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက 40% တိုးလာသည်။ လည်ပတ်နေစဉ်အတွင်း၊ မီးခိုးငွေ့ခေါင်းစွပ်ရှိ လေတိုက်နှုန်းမှာ 0.5m/s ဖြစ်ကြောင်း သေချာစေရန်နှင့် အကာအကွယ်ထိရောက်မှုကို ထိန်းသိမ်းရန် nitrile လက်အိတ်များကို အသုံးပြုပါ။

PCR စမ်းသပ်မှုများသည် ပိုမိုရှုပ်ထွေးသော အပူချိန်နှောင့်ယှက်မှုများနှင့် ရင်ဆိုင်ရနိုင်သည်။ Taq enzyme နှင့် reverse transcriptase ကဲ့သို့သော ဓာတ်ပစ္စည်းများသည် ရုတ်တရက် အပူချိန်အတက်အကျများအတွက် အလွန်အမင်းထိခိုက်လွယ်သည်။ -20°C ရေခဲသေတ္တာမှ ဖယ်ရှားပြီးနောက် ပြွန်နံရံများတွင် ငွေ့ရည်ဖွဲ့မှုသည် တုံ့ပြန်မှုစနစ်ထဲသို့ ဝင်ရောက်ပါက အင်ဇိုင်း 15% ကျော် ဆုံးရှုံးနိုင်သည်။ dNTP ဖြေရှင်းချက်များသည် အခန်းအပူချိန် (>30°C) နှင့် ထိတွေ့ပြီးနောက် 5 မိနစ်အကြာတွင် တွေ့ရှိနိုင်သော ပြိုကွဲမှုကိုလည်း ပြသနိုင်သည်။ အပူချိန်မြင့်မားမှုကြောင့် ကိရိယာလည်ပတ်မှုကိုလည်း အဟန့်အတားဖြစ်စေသည်။ ဓာတ်ခွဲခန်းပတ်ဝန်းကျင် အပူချိန်သည် >35°C ရှိပြီး PCR ကိရိယာ၏ အပူထုတ်လွှတ်မှု ကင်းရှင်းမှုသည် မလုံလောက်သောအခါ (နံရံမှ <50 cm)၊ အတွင်းအပူချိန် ကွာခြားမှုသည် 0.8°C အထိ ရှိလာနိုင်သည်။ ဤသွေဖည်မှုသည် 96- well plate ၏အစွန်းရှိ ချဲ့ထွင်မှုစွမ်းဆောင်ရည်ကို 40% ကျော်ထိ ကျဆင်းသွားစေနိုင်သည်။ ဖုန်မှုန့်များကို ပုံမှန် သန့်စင်သင့်သည် (ဖုန်မှုန့်များ စုပုံနေခြင်းသည် အပူပျံ့ခြင်း ထိရောက်မှုကို 50%) လျော့နည်းစေပြီး တိုက်ရိုက်လေအေးပေးစက်ကို ရှောင်ရှားသင့်သည်။ ထို့အပြင်၊ PCR စမ်းသပ်မှုများကို ညတွင်းချင်း လုပ်ဆောင်သောအခါ၊ နမူနာများကို သိမ်းဆည်းရန် "ယာယီရေခဲသေတ္တာ" အဖြစ် PCR တူရိယာကို အသုံးပြုခြင်းမှ ရှောင်ကြဉ်ပါ။ 4°C တွင် 2 နာရီထက်ပို၍ သိုလှောင်ခြင်းသည် အပူပေးအဖုံးပိတ်ပြီးနောက် ငွေ့ရည်ဖွဲ့မှုကို ဖြစ်စေနိုင်ပြီး တုံ့ပြန်မှုစနစ်အား ပျော့ပျောင်းစေကာ တူရိယာ၏သတ္တုမော်ဂျူးများကို ထိခိုက်စေနိုင်ချေရှိသည်။

အပူချိန်မြင့်မားသောသတိပေးချက်များနှင့်ရင်ဆိုင်ရပါက မော်လီကျူးဓာတ်ခွဲခန်းများသည် အချက်ပေးသံကိုလည်း အသံပေးသင့်သည်။ အဖိုးတန် RNA နမူနာများကို -80°C ရေခဲသေတ္တာ၏နောက်ဘက်တွင် သိမ်းဆည်းထားသင့်ပြီး အပူချိန်မြင့်မားသောကာလများတွင် အသုံးပြုခွင့်ကို ကန့်သတ်ထားသည်။ -20°C ရေခဲသေတ္တာကို တစ်ရက်လျှင် ငါးကြိမ်ထက်ပို၍ဖွင့်ခြင်းသည် အပူချိန်အတက်အကျကို ပိုမိုဆိုးရွားစေပါသည်။ မြင့်မားသော အပူထုတ်ပေးသည့် ကိရိယာသည် နှစ်ဖက်စလုံးနှင့် နောက်ဘက်နှစ်ဖက်တွင် အနည်းဆုံး 50 စင်တီမီတာ အပူပျံ့သည့်နေရာ လိုအပ်သည်။ ထို့အပြင်၊ RNA ထုတ်ယူခြင်းနှင့် qPCR တင်ခြင်းကဲ့သို့သော အပူချိန်-အထိခိုက်မခံသည့် လုပ်ဆောင်မှုများအတွက် စမ်းသပ်ချိန်ကို ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းရန် အကြံပြုထားသည်- 7:00 မှ 10:00 AM၊ ဒေတာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းကဲ့သို့ စမ်းသပ်မဟုတ်သော အလုပ်အတွက် 1:00-4:00 PM။ ဤနည်းဗျူဟာသည် ပြင်းထန်သောအဆင့်များကို နှောင့်ယှက်ခြင်းမှ အပူချိန်မြင့်သော တောင်ထွတ်များကို ထိရောက်စွာ ဟန့်တားနိုင်သည်။

အပူလှိုင်းတစ်ခုအတွင်း မော်လီကျူးစမ်းသပ်မှုများသည် နည်းပညာနှင့် စိတ်ရှည်မှုနှစ်ခုလုံးကို စမ်းသပ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ မဆုတ်မနစ်သောနွေရာသီနေရောင်အောက်တွင်၊ သင့်ပိုက်ပက်ကိုချပြီး ကိရိယာကို အပူပိုသက်သာစေရန် သင့်နမူနာများတွင် ရေခဲသေတ္တာတစ်ခုထပ်ထည့်ရမည့်အချိန်ဖြစ်ကောင်းဖြစ်နိုင်သည်။ အပူချိန်အတက်အကျများကို ရိုသေလေးစားမှုသည် ပူလောင်သောနွေရာသီလများအတွင်း အဖိုးတန်ဆုံးဓာတ်ခွဲခန်းအရည်အသွေးဖြစ်သည်—အမှန်ဆိုလျှင် နွေရာသီ၏ 40°C အပူရှိန်တွင်၊ မော်လီကျူးများပင်လျှင် ဂရုတစိုက်စောင့်ကြပ်ထားသော “ဝင်ရိုးစွန်းအတုဒေသ” လိုအပ်ပါသည်။