နွေရာသီသိပ္ပံလမ်းညွှန်- ၄၀°C အပူလှိုင်းသည် မော်လီကျူးစမ်းသပ်မှုများနှင့် ဆုံတွေ့သောအခါ

မကြာသေးမီက တရုတ်နိုင်ငံ၏ နေရာအများစုတွင် အပူချိန်မြင့်မားမှုများ ဆက်လက်ဖြစ်ပေါ်နေခဲ့သည်။ ဇူလိုင်လ ၂၄ ရက်နေ့တွင် ရှန်တုံပြည်နယ် မိုးလေဝသစောင့်ကြည့်ရေးဌာနက အဝါရောင် အပူချိန်မြင့်မားမှု သတိပေးချက် ထုတ်ပြန်ခဲ့ပြီး ကုန်းတွင်းဒေသများတွင် နောက်လေးရက်အတွင်း “ဆော်နာကဲ့သို့” အပူချိန် ၃၅-၃၇°C (၁၁၁-၁၃၃°F) နှင့် စိုထိုင်းဆ ၈၀% ရှိနိုင်သည်ဟု ခန့်မှန်းထားသည်။ ရှင်ကျန်းပြည်နယ်၊ တာပန်ကဲ့သို့သော နေရာများတွင် အပူချိန်များသည် ၄၈°C (၁၁၁-၁၃၃°F) အနီးတွင် ရှိနေသည်။ ဝူဟန်နှင့် ဟူဘေးပြည်နယ်၊ ရှောင်ဂန်တို့သည် လိမ္မော်ရောင်သတိပေးချက်အောက်တွင် ရှိနေပြီး အချို့နေရာများတွင် အပူချိန် ၃၇°C ကျော်ရှိသည်။ ဤပူပြင်းသောအပူဒဏ်တွင် ပိုက်ပက်များ၏ မျက်နှာပြင်အောက်ရှိ အဏုကြည့်မှန်ပြောင်းဖြင့်သာ မြင်နိုင်သော ကမ္ဘာသည် ပုံမှန်မဟုတ်သော နှောင့်ယှက်မှုများကို ကြုံတွေ့နေရသည် - နျူကလစ်အက်ဆစ်များ၏ တည်ငြိမ်မှု၊ အင်ဇိုင်းများ၏ လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ဓာတ်ကူပစ္စည်းများ၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ အခြေအနေများအားလုံးသည် အပူလှိုင်းကြောင့် တိတ်တဆိတ် ပုံပျက်နေပါသည်။

နျူကလီးအစ်အက်ဆစ် ထုတ်ယူခြင်းသည် အချိန်နှင့်အပြိုင် အပြိုင်ဖြစ်လာသည်။ အပြင်ဘက်အပူချိန် ၄၀°C ကျော်လွန်သောအခါ၊ အဲယားကွန်းဖွင့်ထားသော်လည်း၊ ခွဲစိတ်စားပွဲ၏ အပူချိန်သည် ၂၈°C အထက်တွင် ရှိနေတတ်သည်။ ဤအချိန်တွင်၊ ပွင့်လင်းစွာထားရှိသော RNA နမူနာများသည် နွေဦးနှင့် ဆောင်းဦးရာသီထက် နှစ်ဆကျော် ပိုမိုမြန်ဆန်စွာ ယိုယွင်းပျက်စီးသည်။ သံလိုက်အစေ့ထုတ်ယူခြင်းတွင်၊ ဘာဖာအရည်သည် ပျော်ရည်၏ အရှိန်မြှင့်လာသော အငွေ့ပျံခြင်းကြောင့် ဒေသတွင်းတွင် ပြည့်နှက်နေပြီး ပုံဆောင်ခဲများသည် အလွယ်တကူ စုပုံသွားသည်။ ဤပုံဆောင်ခဲများသည် နျူကလီးအစ်အက်ဆစ် ဖမ်းယူမှု၏ စွမ်းဆောင်ရည်တွင် ကြီးမားသော အတက်အကျများကို ဖြစ်စေလိမ့်မည်။ အော်ဂဲနစ် ပျော်ရည်များ၏ အငွေ့ပျံမှုသည် တစ်ပြိုင်နက်တည်း တိုးလာသည်။ ၃၀°C တွင်၊ ကလိုရိုဖောင်း အငွေ့ပျံမှုပမာဏသည် ၂၅°C နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ၄၀% တိုးလာသည်။ လည်ပတ်နေစဉ်အတွင်း၊ အငွေ့အဖုံးရှိ လေတိုက်နှုန်းသည် 0.5m/s ရှိကြောင်း သေချာစေရန်နှင့် အကာအကွယ်ထိရောက်မှုကို ထိန်းသိမ်းရန် နိုက်ထရိုက်လက်အိတ်များကို အသုံးပြုရန် လိုအပ်ပါသည်။

PCR စမ်းသပ်ချက်များသည် ပိုမိုရှုပ်ထွေးသော အပူချိန်ကွဲလွဲမှုများနှင့် ရင်ဆိုင်ရလေ့ရှိသည်။ Taq enzyme နှင့် reverse transcriptase ကဲ့သို့သော reagents များသည် ရုတ်တရက် အပူချိန်အတက်အကျများကို အလွန်ထိခိုက်လွယ်သည်။ -20°C ရေခဲသေတ္တာမှ ဖယ်ရှားပြီးနောက် ပြွန်နံရံများပေါ်တွင် ငွေ့ရည်ဖွဲ့ခြင်းသည် ဓာတ်ပြုမှုစနစ်ထဲသို့ ဝင်ရောက်ပါက အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှု 15% ကျော် ဆုံးရှုံးစေနိုင်သည်။ dNTP ဖြေရှင်းချက်များသည် အခန်းအပူချိန် (>30°C) တွင် မိနစ် 5 ထိတွေ့ပြီးနောက်တွင်လည်း တွေ့ရှိနိုင်သော ယိုယွင်းပျက်စီးမှုကို ပြသနိုင်သည်။ ကိရိယာလည်ပတ်မှုကိုလည်း အပူချိန်မြင့်မားမှုကြောင့် အဟန့်အတားဖြစ်စေသည်။ ဓာတ်ခွဲခန်းပတ်ဝန်းကျင်အပူချိန် >35°C ရှိပြီး PCR ကိရိယာ၏ အပူပျံ့နှံ့မှု ရှင်းလင်းရေး မလုံလောက်သောအခါ (နံရံမှ <50 cm)၊ အတွင်းပိုင်းအပူချိန်ကွာခြားချက်သည် 0.8°C အထိ ရောက်ရှိနိုင်သည်။ ဤသွေဖည်မှုသည် 96-well plate ၏ အစွန်းတွင် amplification efficiency ကို 40% ကျော် ကျဆင်းစေနိုင်သည်။ ဖုန်မှုန့် filter များကို ပုံမှန်သန့်ရှင်းရေးလုပ်သင့်သည် (ဖုန်မှုန့်စုပုံခြင်းသည် အပူပျံ့နှံ့မှုစွမ်းဆောင်ရည်ကို 50% လျော့ကျစေသည်) နှင့် တိုက်ရိုက်လေအေးပေးစက်ကို ရှောင်ကြဉ်သင့်သည်။ ထို့အပြင်၊ PCR စမ်းသပ်ချက်များကို တစ်ညလုံးလုပ်ဆောင်သည့်အခါ PCR ကိရိယာကို နမူနာများသိမ်းဆည်းရန် "ယာယီရေခဲသေတ္တာ" အဖြစ်အသုံးပြုခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။ ၄°C တွင် ၂ နာရီထက်ပို၍ သိမ်းဆည်းခြင်းသည် အပူပေးထားသောအဖုံးပိတ်ပြီးနောက် ငွေ့ရည်ဖွဲ့စေပြီး ဓာတ်ပြုမှုစနစ်ကို ပျော့ပျောင်းစေပြီး ကိရိယာ၏ သတ္တုမော်ဂျူးများကို သံချေးတက်စေနိုင်သည်။

အပူချိန်မြင့်မားခြင်းဆိုင်ရာ သတိပေးချက်များကို အဆက်မပြတ် ရင်ဆိုင်နေရသည့် မော်လီကျူးဓာတ်ခွဲခန်းများသည်လည်း အချက်ပေးသံများ ပေးသင့်သည်။ အဖိုးတန် RNA နမူနာများကို -၈၀°C ရေခဲသေတ္တာ၏ နောက်ဘက်တွင် သိမ်းဆည်းထားသင့်ပြီး အပူချိန်မြင့်မားသောကာလများတွင်သာ ဝင်ရောက်ခွင့်ကန့်သတ်ထားသည်။ -၂၀°C ရေခဲသေတ္တာ၏ တံခါးကို တစ်နေ့လျှင် ငါးကြိမ်ထက်ပို၍ ဖွင့်ခြင်းသည် အပူချိန်အတက်အကျကို ပိုမိုဆိုးရွားစေပါသည်။ အပူမြင့်မားစွာ ထုတ်လုပ်သည့် စက်ပစ္စည်းများသည် ဘေးနှစ်ဖက်စလုံးနှင့် နောက်ဘက်တွင် အပူပျံ့နှံ့ရန် နေရာ အနည်းဆုံး ၅၀ စင်တီမီတာ လိုအပ်သည်။ ထို့အပြင်၊ စမ်းသပ်မှုအချိန်ကို ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းရန် အကြံပြုထားသည်- RNA ထုတ်ယူခြင်းနှင့် qPCR တင်ခြင်းကဲ့သို့သော အပူချိန်အာရုံခံလုပ်ဆောင်ချက်များအတွက် နံနက် ၇:၀၀-၁၀:၀၀ နာရီ၊ ဒေတာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းကဲ့သို့သော စမ်းသပ်မှုမဟုတ်သောအလုပ်များအတွက် ညနေ ၁:၀၀-၄:၀၀ နာရီ။ ဤနည်းဗျူဟာသည် အပူချိန်မြင့်မားသော အထွတ်အထိပ်များသည် အရေးကြီးသောအဆင့်များကို အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေခြင်းမှ ထိရောက်စွာ ကာကွယ်နိုင်သည်။

အပူလှိုင်းကာလအတွင်း မော်လီကျူးစမ်းသပ်မှုများသည် နည်းစနစ်နှင့် စိတ်ရှည်မှု နှစ်မျိုးလုံးကို စမ်းသပ်ခြင်းဖြစ်သည်။ နွေရာသီနေရောင်အောက်တွင်၊ ကိရိယာသည် အပူပိုမိုပျံ့နှံ့စေရန်အတွက် သင်၏ပိုက်ပက်ကိုချပြီး သင်၏နမူနာများတွင် ရေခဲဘူးတစ်ဘူးထပ်ထည့်ရန် အချိန်တန်ပြီဖြစ်ကောင်းဖြစ်နိုင်သည်။ အပူချိန်အတက်အကျအပေါ် ဤလေးစားမှုသည် ပူပြင်းသောနွေရာသီလများအတွင်း အလွန်အဖိုးတန်ဆုံးဓာတ်ခွဲခန်းအရည်အသွေးဖြစ်သည် - နွေရာသီ၏ ၄၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်အပူချိန်တွင် မော်လီကျူးများပင် ဂရုတစိုက်ကာကွယ်ထားသော “အတုဝင်ရိုးစွန်းဒေသ” လိုအပ်ပါသည်။